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Valutazione
di un nuovo sistema per 1'antibiogramma colorimetrico dei Micoplasmi urogenitali
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BROCCO
S., PANDOLFI A., RUGGERI S. Laboratorio Analisi
Cliniche e Micrbiologiche CLINI.LAB Srl, Via Adriatica 50, 64026 ROSETO
DEGLI ABRUZZI (TE) |
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INTRODUZIONE
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Le
infezioni cervico-vaginali e uretrali rappresentano un problema di ampia
incidenza in età feconda, di frequente attribuibili alla presenza
di micoplasmi urogenitali. In particolare Mycoplasma hominis
(Mh) ed Ureaplasma urealyticum (Uu) sono stati
associati, con maggiore o minore evidenza eziopatogenetica, ad un'ampia
varietà di condizioni cliniche: uretriti, prostatiti, malattia infiammatoria
pelvica, infertilità, etc. |
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L.S.
= liege sensib. |
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Nello
studlio presentiamo i risultati di una sperimentazione condotta nel nostro
laboratorio nel corso di sei mesi su tamponi vaginali risultati positivi
per la presenza di Mh e/o Uu. Sul materiale selezionato è
stato sperimentato il nuovo sistema colorimetrico,
ATR-7 micoplasmi, per I'esecuzione dell'antibiogramma. |
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F
+/ |
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rest
non confornle |
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c
= balsa concentrazione anlibiotica C.' = alts concentrazione antibiotics
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-
= assenza ili crescita batterica (giallo) +
- Crcscila ballcrica (rosso) |
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MATERIALI
E METODI |
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+/-=
debole crcscita batterica (arancio) |
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I
campioni processati provenivano dall'esecuzione ambulatoriale
di tamponi cervico-vaginali da donne prevalentemente in età feconda
affette da cervico-vaginite. |
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La
ricerca dei Micoplasmi veniva eseguita seminando direttamente
il materiale clinico su Kit Micoplasma - test (Liofilchem-Bouty). Esso
è costituito da brodo
di arricchimento, terreno agarizzato su piastra (per I'isolamento e la
conta delle colonie) e test arginina, urea e glucosio per I'identificazione.
Sui campioni risultati positivi per Mh o Uu, indipendentemente dal valore
di cut-off attualmente consigliato dagli Autori fraricesi (10°
UFC), sono stati eseguiti gli antibiogrammi utilizzarndo il nuovo sistema
colorimetrico ATR-7 micoplasmi. Il sistema è
costituito da una piastra a 18 pozzetti contenenti
sei antibiotici a doppia concentrazione: |
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tetraciclina
(pozz. 1-2, 4-8 fig/ml), perfloxacina (pozz. 3-4, 8-16 pghnl), clindamicina
(pozz. 5-6, 8-16 fig/ml), lincomicina (pozz. 7-8, 2-4 pg/ml), eritromicina
(pozz. 9-10, 8-16 pg/ml), claritromicina (poz. 11-12, 8-16 fig/ml), controllo
(pozz. 13-14), norfloxacina (pozz. 15-16 5-10 pg/ml) e 4 pozzetti liberi
per il saggio di altri antibiotici. |
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L'antibiogramma
viene eseguito prelevando 50 microlitri di brodo di arricchimento per
Micoplasmi (precedentemente incubato a 37° C per 24 ore con materiale
clinico da analizzare) sospendendoli nel brodo di inoculo. Vengono, quindi,
trasferiti 200 microlitri della sospensione in ciascun pozzetto del sistema
che verrà ricoperto con olio di vasellina sterile. Dopo 24-48 ore
di incubazione sarà possibile osservare il viraggio del colore dei
pozzetti controllo (rosso o rosso fucsia) e quindi interpretare i risultati.
La presenza dei Micoplasmi, e quindi la resistenza all'antibiotico, viene
evidenziata con il viraggio del brodo verso il rosso per I'utilizzo dell'urea
e/o arginina. La sensibilità viene evidenziata dal colore giallo
del pozzetto (assenza di crescita dei micoplasmi) (tabella 1, figura I).
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RISULTATI
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Dal'
1 aprile 1993 al 30 setternbre 1993 sono state eseguite 100 culture per
la ricerca di Mh e Uu da tampone cervicovagirlale di cui 35 sono risultate
positive (35%). In particolare 32 colture positive
per Uu (91.4%) e 3 casi per positività
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A111
-u c(,rl ,icr,,O ir~uit)NALL
AfvIt-n |
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r,u: (fAI
Hn, A~.111') 1,in.ItKO2
AWr0 1 )- |
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Mh ; Uu 376 |
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UU 3276 |
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FIGURA II |
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Frequenza di i.solamento di micoplasnri rrrr;genitali |
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8. t3.i. C R.-~ |
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FIGURA IV |
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Ureaplasma urealpticurn, Micoplasma hominis: sensibilità agli antibiotici |
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DISCUSSIONE |
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II nostro studio sulla sensibilità dell'Mh e Uu agli antibiotici ha evidenziato una spiccata attività della tetraciclina e claritromicina sia nei confronti di Mh e Uu. II sisterma da noi valutato, inoltre, si è rnostrato sensibile, specifico e rapido ponendosi quindi come un ottimo ausilio per la refertaziorie rapida tale da consentire al clinico un intervento terapeutico adeguato nei casi di infezione da Micoplasmi urogenitali. |
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BIBLIOGRAFIA DI RIFERIMENTO |
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Gaudin O(:. Infections hurnaines a' mycoplasnws. Encyclopedie Medico - Chirurgicale, 8039 V 10. |
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Quentin C et al. Scnsibilite aux antibiotiyucs (ICS nrycoplasmcs pathogcnes pour I'Itornrne. Pathol Itiol 1985: 33:205. |
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FIGURA III |
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Ureaplasma nrealt'tic'rnrt: sert,cibilitn agli antibiotici |
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Taylor - Robinson D. Ureaplasma urealoicvm (T - strain Mycoplasrna) and MYcophrsma hontini.c. In: Mandell UI,, Douglas RG, Bennett JE: Principles and practice of infections disease. Wiley Medical (Ed) 1985: 107(1. |
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mista Mh e Uu (8.60,'0 (figura II). |
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Taylor - Robinson I). The genital mycoplasmes. N Engl J Med 1980; 302:1003. |
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Gli antibiogrammi vengono eseguiti su tutti i campioni risultati positivi sia da coltura su brodo che su agar. Nelle figure III e IV vengor)o riportati i risultati dello studio sulla sensibilità agli antibiotici ottenuti da campioni positivi per Uu (figura 111) e Mh e Uti (figura IV). |
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Possiamo riassumere schematicamente la reazione dell'Uu ai vari antibiotici in ordine di sensibilità decrescente: tetraciclina > claritrornicina > eritromicina --- clindamiciria > pefloxacina > norfloxacina > lincomicina. |
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Nel caso di infezione mista Mh/Uu: |
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tetraciclina > claritromicina = clindamicina > eritromicina = norfloxacina>- pefloxacina = lincomicina. |
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nrrI I.vn, nyr,RIa.( ) rd~-i( )rr-~ir nrvn 11 |
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N1 1( rtrx310i c~cin r rrnir n vni 0 ru st,'Ii R1 1 2 nnr11 1 <rM |
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